Basic Research - Cancer(구연) (NP-005) 요로상피 세포암 T24 세포주를 이용한 전이와 세포사멸에 관련된 AMPK 와 Reactive oxygen species 의 역할 인하대학교 의과대학 비뇨기과학교실¹, 약리학교실² 강동혁¹, 최보화², 박원희¹, 이택¹, 박창신², 윤상민¹ 목적: 방광암은 50 %에서 재발하며, 15 %에서 던 높은 병기로 진행하는 것으로 알려져 있다. 이런 진행성 암의 기전으로 세포 항상성에 관여하는 AMPK 와 세포의 산화스트레스에 관련된 Reactive oxygen stress (ROS) 의 병합기전이 주요한 역할을 할 가능성이 높다. 이에 본 연구에서는 방광암 세포인 T24 세포를 이용하여 이 두 기전의 역할에 대하여 관찰하고자 하였다. 대상 및 방법: 세포는 사람 요로상피암 세포주 T24 를 한국 세포주 은행에서 얻었다. 세포배양은 60 mm 조직 배양 플레이트에서 하루동안 키운 후 compound C (Calbiochem, Bad Soden, Germany), AICAR (Calbiochem), NAC (Sigma), TEMPOL (sigma) 등을 적용하였다. 또한 Western Blot 을 통하여 전체 및 인산화 형태를 chemiluminescence ECL kit (Pierce)로 관찰하였고, densitometry program (Bio 1D, Ver.97, Vilbert Lourmat, France)으로 강도 (intensity)를 확인하였다. 결과. AICAR은 AMPK 의 활성인자이며, Compound C 는 억제제로 사용된다. NAC 와 Tempol은 ROS scavenger로 사용되지만, 다른 타겟 을 가지고 있다. Matrix metalloproteinases (MMPs) 분석을 이용하여 invasion 활성을 관찰한 결과 AICAR, compound C 와 tempol 주입 세포들은 MMP-2 와 MMP-9 표현에 변화가 없었지만, NAC 주입세포에서는 MMP-2 와 MMP-9의 표현이 감소하였다.MTT 세포 증식분석과 Western blot 분석을 이용한 세포 생존분석에서는 Compound C와 tempol 주입세포에서는 변화가 없었지만, AICAR과 NAC 주입세포에서 세포사멸이 증가하였다 (그림 1). 결론.요로상피암 세포주 T24 세포에서 세포생존과 전이는 항산화 효과와 이와 관련된 세포항상성을 유지하기 위한 AMPK의 활성이 밀접한 관련성을 가지고 있다. ROS scavenging 은 T24 세포의 전이활성을 감소시키고, 세포 사멸을 증가시켰으며, AMPK 활성화가 T24 세포사멸을 증가시켰다. keywords : Bladder tumor, AMPK, ROS